免疫印迹试验已成为一种常规技术,用于识别目标蛋白质,但不能有效对未知蛋白进行鉴别。虽然定量不够准确,但可作为半定量方法使用。该技术与化学发光技术相结合,可以对多组分供试品的多目标成分进行识别。由于抗体对其抗原识别的高度特异性,在生物制药领域,免疫印迹法常作为鉴别试验使用。
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/immunoblotting test of pharmaceutical products/
最后更新 2025-02-05
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利用相应的分离技术、抗原和其抗体特异性结合性质、相应的显色手段等,主要检测供试品中目标蛋白质的方法。一种将电泳和免疫化学分析技术相结合的综合技术。属免疫生化技术。该法又称蛋白质印迹(Western blotting),具有抗干扰能力强、检测灵敏度高、特异性强等特点。
- 英文名称
- immunoblotting test of pharmaceutical products
- 所属学科
- 现代医学
基本步骤包括:应用电泳等对供试品的成分进行分离;将分离后的成分转印在基质膜(如硝酸纤维素膜等)上;封闭非特异性位点,加入针对目标成分的抗体,目标成分与其抗体结合;并应用有效的显色手段展示结果,如辣根过氧化物酶标记法、荧光素标记法等。
用于药品研发、生产监测、质量控制、监管生产企业等各个方面。如:药品研发、监测生产过程、评价终制品质量、评估货架期制品质量、监管制品生产企业、打击假冒伪劣药品等。
免疫斑点法与免疫印迹法的原理和试验步骤大体相同。所不同的是,免疫斑点法没有电泳等分离步骤,直接将供试品转印到基质膜上,这使得免疫斑点法检测周期相对缩短,但也易受到供试品中非目标成分的干扰。
扩展阅读
- 王军志.生物技术药物研究开发和质量控制.2版.北京:科学出版社,2007.