生物学活性是评价药物临床有效性和批间一致性的关键指标。

常用的生物学活性测定方法主要包括以下四种：①体内动物试验。通过检测药物作用于实验动物产生的药效作用来测定其生物学活性。实验动物对供试品的生理反应可预测临床效果，应根据种系、性别、年龄和体重等选择敏感的实验动物，也可采用疾病动物模型来进行活性测定。早期的生物学活性测定主要依赖于动物试验，但其操作烦琐、变异度大，已多数被细胞试验代替。对于一些作用机制复杂的药物，仍需要采用动物试验，如促红细胞生成素（EPO）的生物学活性测定方法为小鼠网织红细胞计数法。②体外组织器官试验。通过检测药物作用于离体组织、器官等产生的药效作用来测定其生物学活性。体外组织实验缩短了动物试验的周期，但是仍依赖于实验动物，不能克服动物个体差异带来的变异度大等缺点，也基本被细胞实验所替代。如B型利钠肽（BNP）的早期测活方法为家兔主动脉法，现已被细胞法替代。③细胞试验。通过检测药物作用于细胞产生的细胞效应来测定其生物学活性。从检测的细胞效应来看，主要有上游效应（受体激活程度）、中间效应（第二信使）、下游效应（细胞因子分泌）和表型效应（增殖、凋亡、迁移等）四种类型。细胞法操作简便、变异度小、定量较准确，已广泛应用于放行检验。经特定基因修饰的细胞也可用于生物学活性测定，如报告基因细胞，将药物特异的DNA反应元件报告基因导入受体阳性的细胞，通过检测药物作用后报告基因的表达变化来测定药物活性。④生化分析试验。采用生化分析的方法测定药物的活性，如酶类制品采用酶反应试验进行活性测定，某些细胞因子、单抗制品类制品采用酶联免疫或受体结合试验测定体外生物学活性。

数据分析指采用适宜的数学模型拟合量效曲线，并进行结果计算。生物学活性测定一般为相对定量，通过比较供试品和标准品的量效曲线，计算供试品的相对生物学活性。多采用平行线法，包括平行直线法和平行曲线法，在所用剂量范围内，前者的对数剂量与反应（或反应的函数）呈直线关系，统计模型为线性模型；后者呈S形曲线关系，常用的统计模型为四参数逻辑斯谛（Logistic）模型。

生物学活性测定的质量标准规定应参考检测方法本身的变异度，动物法一般为标示量的50%～200%，细胞法一般为标示量的80%～150%，生化分析法一般为80%～120%。