生物学测定方法决定了生物技术药检定方法的特殊性。这是由于生物技术药具有生物学活性，分子量大，有复杂的一级到多级空间结构，稳定性差，蛋白质易发生聚合，有些还有异构体等。特别是生物学测定的结果波动范围比较大，经常要使用活体动物或细胞，这些有机体本身就具有较大的可变性；有些利用酶联反应，反应体系的变化也会影响检测结果的准确性。

生物技术药检定方法是生物技术药研究和开发的重要组成部分，其检测技术的研究需要在符合相关法规和技术规范的基础上，结合生物技术药的特点，建立检定方法，同时经过方法学验证，确定适宜的标准范围。检定方法一般来源于政府部门或国际组织推荐的各级检定实验室使用的方法，这些方法已经经过了适当的验证，如国家药典颁布的方法。也有来自参考文献的方法，这类方法适合检测某种生物技术药，但在应用于其他产品时需要进行充分的验证。另外新建立的方法需要按专属性、灵敏度、精密性、准确性、耐用性等因素进行方法学验证和多实验室联合验证。

生物学活性检定是生物技术药检定方法的关键项目，检定生物技术药活性的方法一般可分为化学结合试验、酶联免疫试验、细胞测定试验和动物试验四类。化学结合试验不依赖活的生物体系，主要基于产品与某种物质的结合特性；或以产品本身的化学反应为设计原理。免疫结合即是一例，结合试验一般用于纯化过程的监测或清洁的验证试验。由于在结合试验中测定的分子不一定都是具有生物活性的分子，所以它一般不用作制品的效力测定。这类方法具有便于操作、精确、稳定等特点。酶反应试验指在体外能促进酶分子的活化或本身具备酶的活性，通过底物的变化检测酶活性，这类方法一般与温度及酶反应时间密切相关，方法比较准确。体外细胞试验指产品可以诱导细胞产生可测定的应答，如细胞聚集、裂解、融合或产生特异的化学物质。细胞测定试验比结合试验具有更大的可变性，因此应精心操作以保证试验结果的一致性。动物试验包括饲养、管理和操作动物。它需要时间长并且具有更大的可变性，一般检定一个药物的生物活性是通过与已知的标准品或未处理（未免疫）的动物进行比较而得。由于使用动物数目多和可变性大，一般讲，动物测定结果的变异度高达50%。

除生物学活性检定外，生物技术药检定方法还有纯度检查方法，如电泳、液相色谱等；含量测定，如蛋白含量、紫外吸收、酶联免疫等；理化性质的鉴定，如特异性鉴别、分子量、等电点、肽图、氨基酸测序、肽链修饰和连接等；残留杂质检测，如宿主细胞残留蛋白、残留DNA、残留抗生素、产品和工艺相关物质等；安全性检测，如无菌检查、热原质试验、异常毒性试验等。