鞭毛生长在某些微生物菌体的表面,呈长丝状、波曲形,为蛋白质附属物,数目为一至数十根,具有运动的功能。在部分原核生物与真核生物中都发现了鞭毛,但两者存在差异。
细菌是否具有鞭毛,以及鞭毛的数目和附着于细菌的位置是细菌分类的重要指标。细菌的鞭毛很纤细,直径一般为10~30纳米。除少数形成鞭毛束(由许多根鞭毛构成)的细菌可以用相差显微镜直接观察到鞭毛外,多数细菌的鞭毛均不能用光学显微镜直接观察到。要用普通光学显微镜观察细菌的鞭毛,需要用鞭毛染色法对其进行染色。
鞭毛染色的基本原理是在染色前先用媒染剂(如单宁酸或明矾钾)处理,使它沉积在鞭毛上,使鞭毛直径加粗,然后用碱性复红、碱性副品红、硝酸银或结晶紫进行染色。
由P.格雷[注]于1926年首创,其媒染液成分包括20%丹宁酸水溶液2.0毫升,硫酸钾铝饱和水溶液5.0毫升,饱和氯化汞水溶液2.0毫升,3%碱性复红乙醇(95%)溶液0.4毫升,临用前混合,且需过滤后方可使用。
E.利夫森[注]于1930年建立了副品红法,并经过2次改良,称为L利夫森氏染色法。其染色剂由3种溶液组成:A为1.5% 氯化钠(NaCl)水溶液,B为3%单宁酸水溶液,C为乙酸副品红0.9克、碱性复品红0.3克溶解于100毫升95%乙醇溶液中。使用时将等体积A和B混合,然后再加2体积C与之相混。
E.柳[注]于1937年建立,1982年由小鹰秀正[注]等进行了改良。媒染剂包括5%石炭酸10毫升,2克单宁酸和10毫升饱和硫酸钾铝。染色剂为饱和结晶紫乙醇溶液,即将12克结晶紫溶于100毫升无水乙醇中。使用时把10份媒染剂与1份染色剂混合,染色5分钟。
M.E.罗德[注]于1958年建立的一种细菌鞭毛镀银染色法。试剂为媒染液和银染液。媒染液:10%单宁酸10毫升加5毫升饱和硫酸钾铝水溶液,再加1毫升苯胺饱和水溶液形成沉淀,摇动后重新溶解,再加入5%氯化铁(FeCl3)水溶液1毫升形成黑色溶液,稳定10分钟后使用。银染液:配制5%硝酸银(AgNO3)水溶液100毫升,取出10毫升后(备用),再向内缓慢加入浓氨水(比重0.880),使形成的沉淀刚好重新溶解,最后将备用的10毫升AgNO3溶液向其中逐滴加入,直至摇动后呈现轻微而稳定的薄雾状溶液为止,避光保存。用媒染液染色3~5分钟,用蒸馏水充分洗涤,然后将银染液滴加至涂片上。加热至接近沸腾,染色3~5分钟。