表面标本片主要是用于观察叶类、花类(如萼片、花瓣、雄蕊、花粉粒)和孢子等药材的表面观特征。应用时根据材料的性质不同,选择不同的方法制片。如较薄的片状材料可采用整体封片法;粉末状的花粉粒和孢子等,可采用涂铺制片法;部分较厚的材料则可撕离其表皮进行封藏。各种制片的方法如下。
生药表面标本片
鉴定叶、花、果实、种子、全草等生药时,取叶片、萼片、花冠、果皮、种皮等材料,加适宜试液,选择不同的方法制成的观察各部位表皮特征的切片。
- 英文名称
- surface specimen of crude drug
- 所属学科
- 现代医学
适用于很薄的叶片、萼片和花瓣等药材的观察。可先剪取需要的部分2小片,各约4毫米见方,一正一反,放在载玻片上。加透化液(最好用水合氯醛液)1~2滴,在小火焰上缓缓加热。火焰高度以1厘米为宜,不可超过2厘米。加热时应当用手执住载玻片一端,保持载玻片在水平状态,在火焰上缓缓左右移动,使透化液呈微沸腾状态,并随时补充蒸发的液体,适当补加蒸馏水,以免析出结晶。加热至材料略呈透明时,可放置待凉,为了防止干燥或水合氯醛结晶析出,可加稀甘油1滴,然后盖上盖玻片在显微镜下观察。如发现透化不完全,可反复加热,直至透明为止。
当上法不能使材料完全透明时,可采用下法,即剪取需要的部分材料约8毫米见方,放入试管中,加透化液2~3毫升,在沸腾水浴中加热至显透明状态(一般需15~20分钟)。将材料小心取出,放在盖玻片上,切成等大的2片,一正一反地并排放好,加透化液或稀甘油1滴,加盖玻片,即可进行观察。
主要用于花粉和孢子的形态观察。一般方法为:取花粉或孢子置于载玻片上,然后按常规的方法用水合氯醛透化后封片。
主要用于花粉粒的形态观察,基本步骤包括:①将收集的材料(花或花粉)放入小玻璃管中,用冰乙酸浸泡,泡软后,将花药弄破。②通过细铜网将花粉滤过到离心管中,经过离心沉淀后,倒去冰乙酸。③加入乙酸酐-硫酸混合液(9∶1),将离心管放入水浴锅中(或具水的烧杯中)加热,一般都要煮沸(花粉壁很薄时,不需要煮沸)。时时取出少许,在显微镜下检查,观察花粉粒内含物是否已全部除去。④分解以后,离心沉淀,倒去混合液,加入蒸馏水,再离心,重复3次。⑤加入50%甘油,将甘油和花粉一起倒入小玻璃管中,并加入少许防腐剂(如麝香草酚、苯甲酸等)。⑥将保存的材料取出少许,用甘油明胶制成片子,以加拿大树胶封边,制成观察固定片子。使用何种封片材料和方法才能使片子保存时间长,而其中的花粉又完好,是值得进一步研究的问题,国外已采用硅油(silicone oil)封片。
很厚的叶片、萼片、花瓣或者浆果和茎的表皮等材料,直接透化不能使它们透明,而且也不便整体封藏,因此需要将表皮撕离。利用镊子可以将软化了的或新鲜材料的表皮撕下来,也可将材料反转,用解剖刀将不需要的各层组织轻轻刮除,只留下表皮。将这样得到的表皮正面朝上放在载玻片上,加透化液1滴,通常只要在小火焰上稍微加热,就可以完全透明,然后封片观察。
经过透明了的表面标本片,均可以制成半永久性或永久性制片。
半永久制片:将临时制片除去水合氯醛液,加1~2滴甘油浸渍片刻,用滤纸吸尽,再重复1次,然后滴加溶化的甘油明胶,加盖玻片,适当加压,放置待冷却凝固,加贴标签即得。
永久制片:最适于整体封藏和涂铺制片的材料,可将其置于带塞小试管或小瓶中,经低浓度和高浓度乙醇、无水乙醇、丙酮、二甲苯等处理,逐步脱水,最后封藏在中性树胶中即得。撕离的表皮则因只有1层细胞,脱水操作可在载玻片上进行。
扩展阅读
- 康延国.中药鉴定学.北京:中国中医药出版社,2003.