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生药解离组织标本片

/dissociated tissue specimen of crude drug/
条目作者时艳

时艳

最后更新 2024-12-03
浏览 205
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利用化学试剂使生药中纤维、导管、管胞、石细胞等彼此不易分离的组织中的细胞间质溶解,并使细胞分离,从而制成的易于观察细胞完整形态的切片。

英文名称
dissociated tissue specimen of crude drug
所属学科
现代医学

解离组织是利用某些化学药品处理材料后,使组织中各细胞间层溶解而令细胞分离。解离组织标本片便于观察完整的细胞形象。

纤维素薄壁细胞的胞间层是由果胶纤维素构成的。果胶纤维素与苛性碱溶液共热就分解,这样就破坏了胞间层而使细胞分离。木化细胞的胞间层常因含有木质素,不受碱液的影响,需要用氧化剂来破坏木质素,细胞才能分离开。经过氧化剂处理后,细胞壁的木质素都被分解,所以不再显木化反应,薄的纤维素细胞壁也常常受到破坏而变形,一般的细胞后含物,如淀粉粒、糊粉粒、草酸钙结晶等也都被除去了,只有抵抗力较强的细胞完整地保存着,如石细胞、纤维、导管、管胞、木栓细胞、角质化的表皮细胞等。

解离组织标本片的制法依所用的化学试剂不同可分四种,即氢氧化钾法、硝铬酸法、氯酸钾法和浓硝酸法,均应按药材的性质选用。如药材内薄壁组织占大部分,木化组织少或分散存在,可用氢氧化钾法;如薄壁组织较少,木化组织较多或集成较大的群束,可用硝铬酸法、浓硝酸法或氯酸钾法。进行组织解离前,将样品切成长约5毫米、直径约2毫米的段或厚约l毫米的片。

取少量材料置于试管中,加适量(2~5毫升)5%氢氧化钾溶液,在沸腾水浴中加热,至用玻璃棒挤压材料能离散为止(一般约需30分钟)。倾去碱液,材料用水洗涤后,取少许在载玻片上用解剖针撕开,用稀甘油封藏后观察。

经过上述处理后,木化细胞仍保留着木质素,所以仍能显示木化反应,草酸钙结晶也仍旧能够看到。这个方法的缺点是成群的纤维和石细胞常难单个分离开。

将材料放在平皿中,加入20%硝酸与20%铬酸的等量混合液,以浸没材料为度,室温放置,至用玻璃棒挤压材料能离散为止。根据材料的坚硬程度和木化程度,通常需0.5~1小时。必要时亦可在水浴上加热使微温,以加速其作用,但要注意其作用程度可使木化细胞变形,甚至溶解。处理完毕后,可洗去酸液,材料如上法洗涤、撕开、封藏后观察。

经此法解离的木化细胞壁不能再显木化反应。

将材料置于试管中,加适量(约5毫升)50%(体积比)硝酸,投入少量氯酸钾粉,并在火焰上或沸腾水浴中加热,待产生的气泡平息后,再及时投入少量氯酸钾,以维持气泡稳定发生,至用玻璃棒挤压材料能离散为止。其余与上法同。

采用此法时,每次投入的氯酸钾不可过多,加热温度不可过高,否则突然产生大量气泡,容易使液体溢出试管。加热时间长短应视材料的硬度和木化程度而定,一般在5~15分钟即可。此法的缺点是必须加热,而且操作过程中会产生有毒的氯气。

将材料投入装有1~2毫升浓硝酸的小试管中,置于酒精灯上加热至微沸,经0.5~1分钟,见材料上下翻腾、起泡即可。撤去火焰,稍冷后用水洗涤。洗涤后即可取材料装片镜检。此法的关键是恰当掌握沸腾时间的长短。此法简便易行,效果甚佳,但浓硝酸沸腾时会冒出大量黄色的有毒烟雾,要在通风处进行。

制成半永久性的解离组织标本片,可将解离后的材料封藏在甘油明胶液中。要将其制成永久性的标本片,可将解离后的材料用解剖针撕开后,用95%乙醇浸洗2次,除去多余的乙醇,再加无水乙醇浸洗2次,以脱去残余的水分,除去无水乙醇再加二甲苯浸洗2次,以除去无水乙醇,最后除去二甲苯,封藏在中性树脂中即得。

  • 康延国.中药鉴定学.北京:中国中医药出版社,2003.

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