由数层柱状细胞组成。浅层由一层排列较整齐的矮柱状细胞构成，胞质内含较多糖原，游离面常有分散的微绒毛。深层为一层或数层立方形或多边形细胞，附于基膜上。中间层细胞多为横行排列的梭形细胞。细胞间彼此嵌合连接，利于上皮的伸展。此种上皮较少，分布较局限，主要分布于眼睑结膜穹隆部、男性尿道海绵体部、肛门、咽、会厌喉面等处。位于咽、会厌、软腭和喉的上皮和胎儿食管的上皮，其柱状细胞的游离面常见纤毛，此种上皮又称为复层纤毛柱状上皮。