过表达筛选的主要步骤包括：
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/over-expression screening/
最后更新 2022-12-23
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利用正向筛选的策略，通过提高被筛查对象的表达水平，鉴定出其中影响某一表型的部分。与失活筛选相对应，都是表型筛选常用的策略。过表达筛选在微生物学、药物发现、干细胞等领域都有很成功的应用。
- 英文名称
- over-expression screening
- 所属学科
- 化学
理想的模式生物应该有着简单的遗传背景，确保在引入过表达文库之前不会出现本底表型。
经典的过表达筛选常使用cDNA文库，比如ES细胞内可能存在维持增殖能力的基因产物，构建其cDNA文库可用于鉴定出具有相应功能的基因；此外，不克隆cDNA，而是利用靶向特异序列的转录激活因子直接上调基因表达，可以构建新型过表达文库。后者的优势是操作简便，利于高通量筛选。
①利用孔板或者芯片筛选。将自定义的过表达文库一一加入多孔板或者芯片阵列中，通过读出信号鉴定表型。②混合文库筛选。将筛选文库转染到细胞或生物体内，通过细胞增殖、凋亡等表型，富集阳性克隆，经测序得出候选基因的序列。
通常过表达筛选要重复进行数轮，阳性克隆通过测序得知基因序列。
过表达筛选
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