1975年英国科学家E.M.萨瑟恩^[注]首创将DNA片段在凝胶中分离，并转移至滤膜上，再利用放射性同位素标记的探针检测DNA样本中某一特定DNA片段技术，称Southern印迹法（Southern blotting）或DNA印迹法（图1）。1979年瑞士米歇尔弗雷德里希生物研究所^[注]的H.托宾^[注]将该方法应用于蛋白质抗原检测，即把凝胶电泳分离的蛋白从凝胶转移至固相支持物硝酸纤维素膜上，再利用放射自显影的方法检测目的蛋白质；1981年美国斯坦福大学的G.R.斯塔克^[注]又建立了基于酶反应的检测方法。这种基于凝胶电泳的可溶性抗原检测技术，被称为蛋白质印迹法（Immunoblotting）或Western印迹法（Western blotting）。其基本过程包括：将混合抗原样品经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）分离，再通过自然吸附、电场力或其他外力作用，将电泳分离后的抗原从凝胶中转移到固化膜上，再根据需要，依次加入抗目的蛋白质的特异性抗体（一抗），以及酶或放射性同位素标记的抗抗体（二抗），最后根据抗体标记示踪物质的不同，在相应的指示系统内观察检测结果（图2）。该技术利用了凝胶电泳的高分辨力、抗原抗体反应的高敏感性及特异性等优点，是用于鉴定和定量检测细胞或组织中特定抗原分子表达的常用免疫学技术，也是鉴定抗原纯化效率的一种重要方法。因此，该技术广泛应用于生物化学、分子生物学、免疫学、肿瘤学及临床疾病诊断等研究中。

图1 Southern印迹法原理示意图

图2 Western印迹法原理示意图