克拉森木质素的提取方法由瑞典科学家P.克拉森(P.Klason)创立,通常用于植物原料中木质素的定量分析。具体方法为:准确称取预先经苯-乙醇(体积比2∶1)混合液抽提,相当于绝干1.0±0.1克(精确到0.1毫克)的脱脂原料;用15毫升质量分数为72%的硫酸(20℃相对质量密度1.6338)在20±1℃下润胀2小时(非木材原料2.5小时);然后加560毫升蒸馏水稀释至酸浓度为3%,加热至微微沸腾,回流反应4小时,得到的水解残渣经过滤、洗涤、烘干后即为克拉森木质素。
为缩短分析时间,减少样品用量,美国国家可再生能源实验室(NREL)提出了克拉森木质素测定的改进方法(NREL/TP-510-42618)。其操作过程为:用3.00±0.01毫升(或4.92±0.01克)质量分数为72%的硫酸;在30±3℃下处理300.0±10.0毫克绝干脱脂木粉60±5分钟,然后加入84.00±0.04毫升蒸馏水将硫酸稀释至4%,密封后置于高压灭菌锅内在121℃下水解1小时;水解残渣经过滤、洗涤、烘干后得到克拉森木质素。
水解过程中有少量木质素溶解于水解液中,测定水解液在波长205纳米处的紫外吸光度,根据吸光系数[一般取110升/(克·厘米)]可计算出酸溶木质素的含量。针叶材和阔叶材的酸溶木质素含量分别为0.2%~0.4%和3%~5%。克拉森木质素和酸溶木质素之和为原料中的总木质素含量。
非木材原料中含有较多灰分,在测定克拉森木质素含量时须通过灼烧扣除其中的灰分含量。在测定克拉森木质素时,原料受强酸和高温的作用,木质素发生严重缩合,其结构已完全不同于原本木质素,因此克拉森木质素不适用于木质素的结构研究。