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荧光偏振免疫分析法

/fluorescence polarization immunoassay; FPIA/
条目作者张晓兵

张晓兵

最后更新 2023-02-16
浏览 169
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利用荧光偏振技术分析抗原-抗体相互作用,可以定量分析荧光标记物、抗原和抗体混合溶液中荧光偏振变化的方法。

英文名称
fluorescence polarization immunoassay; FPIA
所属学科
化学

最早由W.B.丹德里克[注]等在1961年提出。1981年M.乔利[注]等第一次将荧光偏振免疫分析法商品化,应用于人血清中的氨基糖苷类抗生素的检测。

荧光偏振免疫分析法是一种均相竞争分析方法,在一定温度和黏度下,荧光偏振度与荧光分子的大小直接相关,游离的荧光标记小分子抗原在溶液中的旋转速度较快,荧光偏振度较小;当荧光标记的小分子抗原与其相应的抗体结合后,形成的大分子在溶液中旋转速度变慢,荧光偏振度增大,利用荧光标记抗原(和待测物)在与特异性的抗体结合前后荧光偏振程度的变化来检测小分子待测物的含量。

荧光偏振免疫分析法最大特点是不需要物理分离结合和未结合的抗原或抗体,即可直接测定,更容易自动化,随着荧光偏振仪的发展,可实现高通量、自动化的快速筛选。荧光偏振免疫分析法测量的荧光偏振度是发射光在荧光偏振方向上的荧光强度比值,受环境因素干扰小,结果可靠稳定、易重复。可用于检测由于受体-配体、DNA-蛋白、肽链-蛋白结合导致的分子体积增大以及因蛋白水解、酶降解导致的体积减小的过程,还可应用于高通量药物筛选、临床检验、农药残留量分析、毒品分析、食品检测和环境监测等。

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