借鉴高效液相色谱(HPLC)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术,使分析通量、灵敏度及色谱峰容量得到极大提升。
超高效液相色谱法
在高效液相色谱的基础上发展、成熟起来的色谱技术。
借鉴高效液相色谱(HPLC)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术,使分析通量、灵敏度及色谱峰容量得到极大提升。
超高效液相色谱法
2004年,沃特世公司基于在色谱固定相制备及填充技术上的创新,率先在超高效液相色谱方面取得突破性进展,研发出全球第一台超高效液相色谱仪——ACQUITY UPLC。这套系统有效地提高了实验室液相色谱分离的速度、分辨率和灵敏度。随后,安捷伦、岛津等公司也相继推出了各自的超高效液相色谱仪器系统。经过十几年的发展,超高效液相色谱系统迅速扩展成为可满足各种需求的一系列产品。
超高效液相色谱法的原理与高效液相色谱法基本相同,其差别主要体现在:①小颗粒、高性能固定相的应用。在常规高效液相色谱中,色谱柱中装填的固定相颗粒粒径通常是5微米或3.5微米,沃特世公司超高效液相色谱色谱柱中装填的填料粒径为1.7微米,其他公司甚至装填1.3微米的固定相,因此可达到更高的分离柱效。②超高压输液泵的使用。由于使用的色谱固定相粒径减小,运行时所产生的压力也自然成倍增大。故液相色谱的输液泵也相应改变成超高压的输液泵。③高速采样速度。因样品流出色谱柱的速度快,且峰型极窄,因此对检测器的灵敏度及采样速度也提出了更高的要求。④低扩散、低交叉污染自动进样器的使用。配备针内进样探头和压力辅助进样技术,保证超高压下进样时系统的稳定性和重复性。⑤仪器整体系统的优化设计。专用色谱工作站的配备,实现系统整体的良好运行。
与传统的高效液相色谱法相比,超高效液相色谱法的速度、灵敏度及分离度分别是高效液相色谱法的9倍、3倍及1.7倍,它缩短了分析时间,同时减少了溶剂用量降低了分析成本。
经过多年的发展,超高效液相色谱在化学、医学、食品等各个领域都得到广泛应用。超高效液相色谱仪尤其对中药研究领域的发展是一个极大的促进。中药的组分复杂,分离困难等问题很大程度上可以通过超高效液相色谱法加以解决。超高效液相色谱法能分离出比高效液相色谱法更多的色谱峰,且具有更好的分辨率。主要应用于:①药物分析。天然产物中复杂组分的分析。②生化分析。蛋白质、多肽、代谢组学等生化样品。③食品分析。食品中农药残留的检测。④环境分析。水中微囊藻毒素的检测等。⑤其他。化妆品中违禁品的检测等。