电化学发光免疫分析技术是将电化学发光和免疫测定相结合的产物,在20世纪90年代一问世就引起了广泛关注。它能对多种物质进行快速分析测定,是较先进的标记免疫分析测定技术。
全自动电化学发光免疫分析仪采用电化学发光(ECL)技术。ECL是一种在电极表面由电化学方法引发的特异性化学发光现象,包括了电化学和化学发光两个过程。通过电化学启动发光反应,可对反应进行精确控制。全自动电化学发光免疫分析系统采用三联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+作为标记物,[Ru(bpy)3]2+标记的生物分子与待测配体发生特异性结合反应后进入流动测量室,此时,电化学发光过程被启动。基本过程是含三丙胺(TPA)的缓冲液进入流动测量室,同时电极施加电压,发光试剂[Ru(bpy)3]2+与电子供体TPA在电极表面同时各失去一个电子发生氧化反应。二价的[Ru(bpy)3]2+被氧化生成三价的[Ru(bpy)3]3+。TPA被氧化成阳离子自由基TPA·+,后者很不稳定,自发地失去一个质子(H+),形成自由基TPA·。由于[Ru(bpy)3]3+是一种强氧化剂,自由基TPA·是一种强还原剂,这两种基团在电极表面迅速反应,三价的[Ru(bpy)3]3+被还原生成激发态的二价[Ru(bpy)3]2+*,TPA·自身被氧化成二丙胺和丙醛。随后激发态的[Ru(bpy)3]2+*衰变成基态的[Ru(bpy)3]2+同时发射一个波长在620纳米的光子。这一过程在电极表面反复进行,产生很多光子,使光信号得以增强。通过光电倍增管检测光强度,光强度与[Ru(bpy)3]2+的浓度呈线性关系,即可测出待测配体的含量。
全自动电化学发光免疫分析仪由样本盘、试剂盘、温育反应盘、电化学检测系统和计算机控制系统组成,具有功能齐全、操作简便、分析灵活、分析速度快、稳定性好、灵敏度高、线性范围宽等优点,适用于心血管动力学、肿瘤因子、甲状腺系统、内分泌系统、感染性疾病、代谢疾病、贫血等临床领域相关项目的定量检测。