20世纪60年代初,荷兰物理化学家J.H.斯鲁伊特斯(J.H.Sluyters)在试验中率先将交流阻抗谱(electrochemical impedance spectroscopy; EIS)用于研究电化学过程。此后,电化学交流阻抗谱逐渐成为研究电极过程、双电层结构及吸附等电极界面性质的有力工具。电化学交流阻抗谱方法因其具有操作简单、检测快速、响应范围广、灵敏度低、无须示踪物标记、可进行实时自动化数据输出等特点,已广泛用于环境污染物监控、食品安全监测、生化分析、疾病早期诊断等研究领域。
由于抗原-抗体特异性结合的免疫产物降低了电活性探针分子([Fe(CN)6]3-/4-)与电极之间的电子转移速率,从而增加了电极表面阻抗。通过测量电极表面免疫反应发生前后电极表面阻抗的差值,实现对目标抗体或抗原的高灵敏、特异性的检测。电化学阻抗分析技术不仅能很好的直观表征电极界面状态,其本身测试的数据还可采用多种形式表示,如能奎斯特图(Nyquist plot)、阻抗波特图(Bode plot)等,从各个角度对数据进行分析,得出科学结论。
随着纳米技术的快速发展,纳米材料因其大的比表面积、易于功能化、良好的电子传导性和生物相容性,已被广泛用于构建电化学阻抗免疫传感器。纳米材料的引用,如碳纳米管、硅纳米线、二维片层纳米材料(如石墨烯、二硫化钼等)、贵金属纳米材料(如金属纳米颗粒、金属氧化物等)、磁性纳米材料以及纳米复合材料等,极大地提升了电化学阻抗免疫传感器的检测性能。一般而言,纳米材料可作为电极修饰材料或纳米生物探针,通过共价键合、包埋、物理吸附和自组装等固定方法,实现对特定抗原或抗体的有效固定。利用抗原-抗体的特异性结合作用,实现了癌胚抗原(CEA)、前列腺特异抗原(PSA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)等目标物高灵敏、特异性检测。电化学阻抗免疫传感器的检测灵敏度可达到10皮克/毫升,并可用于实际体系中特定抗体或抗原的测定。