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生物分子相互作用分析

/biomolecular interaction analysis; BIA/
条目作者樊春海万莹
条目作者樊春海

樊春海

万莹

万莹

最后更新 2022-12-08
浏览 106
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基于表面等离子共振现象发展的一种生物传感分析技术。

英文名称
biomolecular interaction analysis; BIA
所属学科
化学

当入射光以临界角从光密介质入射到光疏介质的界面时将产生全反射,且反射光强度在各个角度上都应相同。若在光疏介质表面镀上一层金属薄膜后,由于入射光可引起金属中自由电子的共振,导致反射光在一定角度内大大减弱,特定角度的反射光将完全消失,该角度称作表面等离子共振角(surface plasmon resonanceangle;SPR angle)。在生物分子相互作用平台(BIAcore)中,光从液相入射到镀有金属薄膜的玻璃表面,产生SPR现象,共振角与金属薄膜表面通过液相的折射率相关,折射率的变化又与结合在金属表面的生物大分子质量成正比。因此,该技术具有实时、定量、无须标记、专一性以及灵敏度高的特点,在生物化学、免疫学、微生物检测、药物筛选及研发、环境监测等领域具有广泛应用。

核心部件包括传感器芯片(sensor chip)、SPR光学检测系统和微射流卡盘(microfluidics)。传感器芯片。是其中最重要的部分,通常为表面镀有金属薄膜的玻璃载片,金属薄膜表面布满可与生物分子发生偶联的亲水基团,最常用的传感片为CM5(表面吸附有羧甲基葡聚糖)。SPR光学检测系统。采用角度扫描模式,检测反射光强度随入射角的变化,得到SPR角,从而判断介质的变化,如质量以及浓度变化。微射流卡盘。作为液体传送系统,通过计算机自动控制,可将极少量的样品及试剂精确地输入流通池。

主要用于动力学研究、生物分子结合位点研究、生物分子浓度测定。动力学研究。最早的应用即是对免疫中抗原-单克隆抗体相互作用的动力学研究,提供抗原-抗体间的反应动力学参数,进行抗体的高效筛选。生物分子结合位点研究。利用BIAcore获取靶分子的拓扑结构信息及结构变换与功能的关系,可对蛋白质之间、DNA之间及蛋白质-DNA间的结合进行分析,典型的如基因表达调控研究中对特定蛋白质-DNA间作用的分析。生物分子浓度测定。是BIAcore的重要应用方向,通过在传感器芯片表面固定可与目标物专一性识别的分子,对特定目标物生物分子进行实时、高灵敏、高选择性的定量测定。

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