简称性别鉴定。对胚胎进行性别鉴定，给母畜移植预知性别的胚胎，可提高优良种畜的利用效率，大大加快育种进程。方法有细胞生物学方法、免疫学方法和分子生物学方法。

世界上第一种鉴定胚胎性别的方法。利用X、Y染色体形态上的差异，通过染色体核型鉴定胚胎细胞性染色体，进而鉴定胚胎的性别。分析性染色体需要用分裂中期的细胞，这对胚胎是一种损伤。该技术的准确率很高，可达100%，但比较复杂且对胚胎损伤大，成功率甚低，在生产实践中没有多大的价值。

从胚胎中取出小部分细胞进行染色体分析，从而鉴定胚胎的性别。鉴定时对胚胎具有很大损伤，因此缺乏应用价值，主要用于验证其他性别鉴定方法的准确性。

在8-细胞期至早期胚泡期，哺乳动物的雄性胚胎表达雌性胚胎所没有的细胞表面因子，即H-Y抗原，利用H-Y抗原和抗体免疫反应的原理可以进行胚胎的性别鉴定。通过鉴定H-Y抗原的有无来鉴别动物胚胎的性别，对鉴定牛、羊和猪胚胎性别的准确率可达80%～90%。但H-Y抗原是弱抗原，H-Y抗血清的特异性较差。由于死细胞无特异荧光反应，故一些胚胎无法做性别鉴定，此法在生产实践中的应用仍有一定的局限性。

利用Y染色体特异的DNA探针与Y染色体上的DNA进行特异性结合是鉴定胚胎性别的方法。早在20世纪80年代就有将牛的Y染色体特异的DNA重复序列作为探针用于牛胚胎的性别鉴定的研究报道。从Y染色体分离筛选出雄性特异性片段作为探针，然后用放射性同位素等进行标记，与被检测胚胎进行DNA印迹法杂交或斑点杂交，并根据显示的斑点来判断是否有Y染色体存在。结果如果是阳性则胚胎为雄性，否则为雌性。由于该方法对胚胎损伤较大，并且鉴定时间较长，以及各种家畜必须采用同种的雄性特异性DNA探针等，都使该法在广泛应用上仍受到一定限制。这种方法的准确率很高，特异性强，但操作烦琐。

20世纪80年代中期发展起来的DNA体外扩增技术。PCR法用于胚胎性别鉴定的实质就是Y染色体特异性片段或Y染色体上的性别决定区（SRY）的检测技术。通过合成SRY基因，或锌指结构基因（ZFY），或其他Y染色体上特异性片段的部分序列作为引物，用少部分胚胎细胞中的DNA为模板，在一定条件下进行PCR扩增反应，能扩增出目标片段的胚胎即为雄性胚胎，否则为雌性胚胎。这种方法对胚胎损害较小，准确率较高，可达90%以上。同时，还具有快速、简便和经济等优点，是最具有商业价值的鉴定胚胎性别的方法。牛胚胎性别鉴定的PCR方法，主要有PCR扩增Y染色体特异性DNA片段法、SRY-PCR法等。

恒温核酸扩增方法，基本原理是分别使用不同的引物，在65℃左右、不到1小时的时间里进行核酸的指数级扩增，反应副产物焦磷酸镁沉淀可用肉眼观察到，以判断是否发生扩增。与PCR方法相比，LAMP法的特点如下：①只需恒定温度就能进行扩增反应。不需要特殊试剂，不需要预先进行双链DNA的变性。②高特异性。③快速高效性。LAMP法在60分钟内就能完成扩增反应。④灵敏度和准确率高 ⑤鉴定简便。观察白色浑浊沉淀就能够判断扩增与否。