端粒酶分析包括对端粒酶活性的检测及端粒酶抑制剂的筛选,可以为肿瘤的预测、诊断及临床治疗提供重要依据。抑制端粒酶活性是癌症治疗的一种潜在方法。
端粒酶分析方法通常是利用端粒酶能合成和延伸端粒的特点来进行设计。端粒酶在体外可以以自身RNA为模板,结合底物(特定的寡核苷酸链),在底物末端延伸合成TTAGGG重复序列。通过对延伸产物直接检测或者结合进一步的生物化学反应将信号放大进行检测实现端粒酶活性分析。基于对延伸产物直接检测的端粒延伸重复序列法于1989年建立,这种方法由于需要样品量大和灵敏度低,不适用于日常分析。为了提高端粒酶检测的灵敏度,1994年提出了端粒重复序列扩增法(telomeric repeat amplification protocol; TRAP)。该方法通过聚合酶链式反应对端粒酶延伸产物扩增后进行检测,能极大提高检测灵敏度,是应用最广的端粒酶分析方法。TRAP方法的局限性在于保留着聚合酶链式反应放大技术带来的缺点,并且在筛选一些有效的端粒酶抑制剂时容易受到聚合酶链式反应衍生产物的影响。随着生物传感器的发展,结合分子生物学和纳米材料放大技术对延伸产物进行检测的多种端粒酶分析方法被建立,这些方法具有简便、准确和灵敏度高等特点。实际应用中,端粒重复序列扩增法仍然是最为广泛应用的方法。基于分子生物学和纳米材料放大技术的新方法在临床样本等复杂体系中的表现需要进一步评估来验证实用性。